АЦ активирующий эффект инсулина, ИФР-1 и ИПП при разных концентрациях в условиях in vitro - Аденилатциклазный сигнальный механизм
Полная версия

Главная arrow Медицина arrow Аденилатциклазный сигнальный механизм

  • Увеличить шрифт
  • Уменьшить шрифт


<<   СОДЕРЖАНИЕ   >>

АЦ активирующий эффект инсулина, ИФР-1 и ИПП при разных концентрациях в условиях in vitro

Установив оптимальное время действия пептидов инсулинового суперсемейства, при котором происходит активация АЦС (2.5 мин), необходимо было выявить при каких концентрациях АЦ стимулирующий эффект пептидов наиболее выражен. В разных тканях стимулирующий эффект пептидов инсулиновой природы осуществляется через специфичные рецепторы, отличающиеся по сродству к пептиду в гомологичных и негомологичных пептиду тканях.

Проведено исследование влияния инсулина, ИФР-1, ИПП моллюска и ЭФР в течение 2.5 мин при разных концентрациях (10-12-10-6М) в мембранных фракциях крыс, кур, моллюсков, а также во фракции, выделенной из культуры клеток куриных миобластов.

В мембранной фракции скелетных мышц крыс стимулирующий АЦ эффект инсулина, ИФР-1, ИПП обнаруживается при концентрациях - 10-11-10-7М (Рис. 8). Наиболее выраженный АЦ стимулирующий эффект составляет: для инсулина +250% при 10-8М; для ИФР-1 +91% при 10-9М; для ИПП +111% при 10-8М; для ЭФР +190% при 10-10М. (Рис. 8).

Можно отметить, что в диапазоне концентраций 10-10-10-7М наиболее четко выражен активирующий АЦ эффект инсулина, эффекты других исследованных пептидов инсулиновой природы проявлялись слабее. АЦ стимулирующий эффект ЭФР проявлялся при более низких концентрациях (10-11-10-10М).

Базальная активность АЦ принята за 100%. Время действия пептидов 2.5 минБазальная активность АЦ принята за 100%. Время действия пептидов 2.5 мин

Рис. 8. Базальная активность АЦ принята за 100%. Время действия пептидов 2.5 мин

Таблица 3. Влияние in vitro разных концентраций инсулина на активность АЦ во фракциях мышечных мембран куриных эмбрионов разного возраста и цыплят

Объекты (возраст)

10-сут

Эмбрионы

13-сут

Эмбрионы

16-сут

Эмбрионы

Цыплята

3-сут

Воздействия

Активность АЦ (пмоль цАМФ/мин/мг белка)

В скобках - Активность АЦ (в%) в присутствии инсулина, по отношению к базальной активности, принятой за 100%.

Без

Инсулина

14.021.10

(100%)

3.900.45

(100%)

2.010.09

(100%)

8.520.41

(100%)

+инсулин

10-11 М

16.341.35

(117%)

4.210.34

(108%)

4.810.46

(239%)

10.110.55

(119%)

+ инсулин

10-10 М

39.141.93

(279%)

10.330.89

(265%)

5.280.30

(263%)

11.240.48

(132%)

+ инсулин

10-9 М

48.252.21

(344%)

15.921.24

(408%)

10.240.62

(509%)

14.540.82

(171%)

+ инсулин

10-8 М

19.871.44

(142%)

9.840.56

(252%)

9.920.47

(494%)

19.551.13

(238%)

+ инсулин

10-7 М

17.130.98

(122%)

4.930.45

(126%)

7.510.33

(374%)

22.211.37

(261%)

+ инсулин

10-6 М

17.901.12

(128%)

5.120.21

(131%)

1.950.22

(97%)

24.391.62

(286%)

Изучение АЦ стимулирующего эффекта пептидов инсулинового суперсемейства и ЭФР в онтогенезе позволило выявить следующие факты. Наиболее выраженный АЦ активирующий эффект инсулина (10-11М-10-6М обнаруживается у куриных эмбрионов (10, 13, 16 суток) и цыплят (3 суток) при концентрации гормона 10-9М, и составляет у 10-суточных эмбрионов +244%, у 13-суточных +308%, у 16-суточных +409% (Таблица 3), а у 3-х суточных цыплят (+186%) при более высокой концентрации 10-6М, что может быть связано с переходом эмбрионов в постэмбриональный период, когда процессы роста и дифференцировки заканчиваются.

Проведенные нами исследования действия инсулина и ИФР-1 на активность АЦ в мембранной фракции, выделенной из культуры клеток куриных миобластов (4-й день развития) показали, что наибольший АЦ стимулирующий эффект инсулина (+352%) выявляется при концентрации 10-9М, а ИФР-1 (+289%) при концентрации 10-10М (данные в диссертации).

В мембранной фракции мышц моллюска АЦ стимулирующий эффект инсулина, ИФР-1, ИПП и ЭФР выявляется при концентрациях - 10-11-10-8М (Рис. 9). Инсулин и ИФР-1 оказывают наиболее выраженное стимулирующее действие на активность АЦ при концентрации 10-8М (+63% и +54%, соответственно), а ИПП и ЭФР при 10-9М (+415% и +223%, соответственно).

Таким образом, определен диапазон концентраций, при которых проявляется АЦ активирующий эффект исследуемых пептидов. Следует отметить видоспецифичность действия пептидов. Действие ИПП, выделенного из висцеральных ганглиев моллюска A.cygnea, является более эффективным в ткани моллюска и менее эффективным в тканях позвоночных.

Рис. 9. Базальная активность АЦ принята за 100%. Время действия пептидов - 2.5 мин.

 
Перейти к загрузке файла
<<   СОДЕРЖАНИЕ   >>