Участие АЦ сигнального механизма в митогенном действии пептидов инсулиновой природы - Аденилатциклазный сигнальный механизм
Полная версия

Главная arrow Медицина arrow Аденилатциклазный сигнальный механизм

  • Увеличить шрифт
  • Уменьшить шрифт


<<   СОДЕРЖАНИЕ   >>

Участие АЦ сигнального механизма в митогенном действии пептидов инсулиновой природы

Для изучения митогенного действия пептидов инсулинового суперсемейства мы использовали фибробластоподобную культуру клеток Swiss 3T3, любезно предоставленную нам из банка культур Института цитологии РАН (Санкт-Петербург). Проведена функциональная характеристика АЦ системы в культуре Swiss3T3 клеток. Установлено, что АЦ система в культуре этих клеток

Таблица 10. Функциональные свойства АЦС культуры Swiss3T3 клеток

Воздействия

Активность АЦ

(пкмоль цАМФ/мин/мг белка)

Стимулирующий АЦ эффект в %

Базальная

30.59 ±1.41

100% (базальная)

NaF 10-2 М

178.91 ±4.15

585% (+485%)

форсколин 10-5 М

99.26 ±3.21

324% (+224%)

ГИДФ 10-6 М

111.20 ±3.48

364% (+264%)

ГТФ 10-5 М

82.98 ±2.92

271% (+171%)

ЭФР 10-9 М

168.31 ±4.75

550% (+450%)

ИФР-1 10-9 М

102.14 ±3.34

334% (+224%)

Инсулин 10-9 М

74.89 ±2.11

245% (+145%)

В скобках - активирующий АЦ эффект агентов гормональной и негормональной природы (в%), по отношению к базальной активности АЦ, принятой за 100%, стимулируется классическими негормональными активаторами АЦ - NaF, форсколином, ГИДФ, ГТФ, а также инсулином, ИФР-1 и ЭФР (таблица 10).

Проведенные нами исследования показали, что в культуре Swiss 3T3 присутствует АЦС с функциональными свойствами, близкими к АЦС других клеток и тканей позвоночных, которая способна к восприятию внеклеточных сигналов различной природы.

Оценив функциональные свойства АЦ сигнальной системы культуры Swiss3T3 клеток, была исследована способность инсулина, ИФР-1 и ЭФР индуцировать в культуре клеток Swiss3T3 митогенный эффект, оцениваемый по включению [14C]-тимидина в ДНК (Рис. 15-1). Показано, что инсулин (1000 нг/мл), ИФР 1 (50 нг/мл) и ЭФР (10 нг/мл) стимулировали синтез ДНК (прирост от 100% до 250%).

Исследуемые пептиды в тех же концентрациях оказывали стимулирующее влияние (2,5 мин) на активность АЦ. (Рис. 15-2). Для подтверждения участия цАМФ в реализации митогенного эффекта был использован его дибутириловый аналог цАМФ, обладающий способностью проникать в клетку. Этот аналог, взятый при низких концентрациях (10-12-10-9 М), вызывал четкий митогенный эффект, по величине даже превосходящий аналогичный эффект ЭФР и ИФР-1. Эффект оценивали по включению [14C]-тимидина в ДНК (Рис. 15-3).

Представленные экспериментальные данные подтверждают нашу гипотезу (Перцева, 2000) об участии АЦ сигнального механизма действия пептидов инсулинового суперсемейства и, продуцируемого им цАМФ, в реализации митогенных процессов.

 
Перейти к загрузке файла
<<   СОДЕРЖАНИЕ   >>